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SDS-PAGE凝膠配制試劑盒試劑使用量

描述：本產(chǎn)品提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制高質(zhì)量的各種濃度的變性PAGE膠，方便，快捷。本試劑盒至少可以配制30塊常規(guī)大小的PAGE膠，并且其中的分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液中已加入10%SDS，使用時(shí)無需另外加入。

灌制濃縮膠（試劑使用量參考附表3）

（1）去除覆蓋在分離膠上的水層，并用濾紙吸干，水份吸不干，可能會(huì)導(dǎo)致濃縮膠和分離膠分開。

（2）將不同體積的30%Acr-Bis（29:1）、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。

（3）加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌混勻，避免產(chǎn)生氣泡。

（4）將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，插入樣品梳，避免產(chǎn)生氣泡，靜置20-30min，直至濃縮膠聚合。

（5）待凝膠聚合后，小心拔下梳子，以免破壞加樣孔。

（6）進(jìn)行常規(guī)電泳。

注意事項(xiàng)：

1.10%APS配置好后，應(yīng)當(dāng)-20℃保存，并且應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間，以防失效。

2.TEMED易揮發(fā)，使用后請(qǐng)擰緊瓶蓋。

3.凝膠凝聚的速度與溫度等關(guān)系密切，可通過調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量，控制凝膠的聚合速度，凝膠聚合過快不利于操作。

4.丙烯酰胺，TEMED等有毒，操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴手套。

5.在凝膠配制過程中，應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡。

6.在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作，加水時(shí)速度不宜過快。