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ATP生物發(fā)光檢測試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點
更新時間:2017-12-22   點擊次數(shù):1059次

ATP生物發(fā)光檢測試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點!信帆生物銷售ATP生物發(fā)光檢測試劑盒。

  • 產(chǎn)品介紹:

利用螢火蟲熒光素酶催化底物熒光素的轉化,利用ATP的能量發(fā)射出光子。發(fā)光信號與存在的ATP量呈正比的原理進行ATP的生物發(fā)光檢測。該產(chǎn)品可用于快速、定量測定液體樣品中或細胞或組織內的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。產(chǎn)品中的Lysis Buffer能夠有效裂解細菌、細胞以及微生物樣品,充分釋放ATP,適用于多種樣本來源的ATP檢測。Luciferase/Luciferin substrate采用優(yōu)化的酶反應體系,產(chǎn)生的熒光在一分鐘內保持穩(wěn)定。該產(chǎn)品檢測靈敏度達到10-16 mol,檢測范圍在10-11至10-16 mol之間,可用于微量ATP檢測。

  • 適用范圍

可用于檢測多種來源樣品中細菌、細胞以及微生物的ATP,及微量ATP檢測。

  • 產(chǎn)品特點

1.  方便:反應試劑容易配制。

2.  檢測試劑產(chǎn)生的熒光穩(wěn)定性高,不需要快速混勻操作。

3.  快速:樣品裂解在5-10分鐘內完成,加入稀釋后的Luciferase/Luciferin substratet即可檢測。

4.  靈敏:可檢測少至10-16 mol ATP。

ATP生物發(fā)光檢測試劑盒產(chǎn)品介紹和產(chǎn)品特點

壁細胞的裂解
吸除培養(yǎng)液,加入足夠覆蓋細胞的Lysis Buffer(如24孔細胞培養(yǎng)板加入150ul Lysis Buffer),可以使用移液器進行反復吹打或晃動培養(yǎng)板使Lysis Buffer充分接觸并裂解細胞,室溫靜置5-10min后,吸取上清進行檢測。

懸浮細菌、細胞的裂解
轉移懸浮液到1.5ml離心管中,離心沉淀細胞,棄上清,按照24孔板每孔的細胞量對應150μl Lysis Buffer的比例加入Lysis Buffer,移液器反復吹打幾次,室溫靜置5-10分鐘后,吸取上清進行檢測。

對于懸浮樣品的裂解也可以將樣品充分混勻后直接吸取適量體積加入Lysis Buffer,移液器反復吹打幾次,室溫靜置5-10分鐘后進行檢測。樣品體積不超過Lysis Buffer的1/3。

植物、動物組織樣品的裂解
取適量組織樣品,加入適當比例的Lysis Buffer(如20mg植物組織加入500ul Lysis Buffer)后用玻璃勻漿器或研缽進行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解,離心后取上清進行檢測。

其它來源的ATP:

對于其它有效方法如三氯乙酸法等提取的ATP樣品,或游離ATP的檢測,可直接稀釋到檢測范圍后用配制好的Luciferase/Luciferin Reagent進行檢測。
3. 樣品測定
(1)ATP標準品的測定:吸取50ul配制好的Luciferase/Luciferin Reagent加入測定管中,放置2分鐘以減少背景發(fā)光值,加入10ul 配制好的ATP標準品,移液器輕輕吹打幾次,立即進行檢測。制作標準曲線的同時設置陰性對照,即不添加ATP,直接將10ul Lysis Buffer加入50ul Luciferase/Luciferin Reagent中進行檢測,測定試劑的背景發(fā)光值。如果背景發(fā)光值過高,可以將配制好的Luciferase/Luciferin Reagent放入測定管后室溫放置15分鐘以消耗ATP,降低背景發(fā)光值。

(2)樣品的測定:吸取50ul Luciferase/Luciferin Reagent加入測定管中,加入10ul 樣品裂解混合液,移液器輕輕吹打幾次,立即進行檢測。
(3)制作標準曲線,根據(jù)標準曲線計算出樣品中ATP的濃度。

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