肥達氏實驗試劑：抗傷寒桿菌O血清，現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎搶購
抗傷寒桿菌O（或H）血清抗體(使用說明書)
本品是由傷寒桿菌O（或H）抗原免疫家兔獲得的抗傷寒桿菌O（或H）血清抗體，與傷寒桿菌O（或H）抗原37℃水浴箱18小時測得效價。
試驗方法：
1.取清潔小試管8支，依次編號。
2.于小試管內(nèi)各注入0.5ml生理鹽水。
3.于*管內(nèi)加入1:10稀釋的抗O（或H）血清0.5ml，用1ml吸管吹吸三次，混勻，吸出0.5ml注入第二管作對倍稀釋，……依次稀釋至第7管，棄去0.5ml，第8管為對照。
4.各管內(nèi)注入傷寒桿菌O（或H）菌液0.5ml；
5.加完菌液后，振蕩試管架，混勻，放置37℃水浴箱18小時后觀察結(jié)果。
快速檢測法（H抗原抗體反應(yīng)）置于50℃水浴箱2-4小時看結(jié)果，但其效價要比過夜觀察低1-2個滴度。
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結(jié)果分析：
先觀察對照管，正確結(jié)果應(yīng)無凝集現(xiàn)象，再觀察各試驗管的凝集現(xiàn)象，凝集程度以“ +”多少表示之。
（++++ ）zui強，上液澄清，細菌全部凝集沉淀于管底。
（+++）強，上液輕度混濁，細菌大部分凝集沉淀于管底。
（+）弱，上液混濁，細菌少部分凝集。
（-）不凝，液體呈乳狀與對照管相同。
效價判定：
以能出現(xiàn)“+ ”凝集現(xiàn)象的血清zui高稀釋度為該血清的凝集效價。
即第1～7孔的血清zui終稀釋度分別為1:40，1:80，1:160，1:320，1:640，1:1280，1:2560。
傷寒、副傷寒及變形菌診斷菌液（使用說明書）
本品系用甲醛配置溶液滅活的傷寒、副傷寒即變形桿菌分別制成，供肥達氏（Widal）和外斐氏（Weil-Felix）反應(yīng)用。
濃度：7.0*109/ml
使用方法：
以生理鹽水溶液稀釋成含菌7.0*108/ml的懸液。將待檢血清稀釋成1:10、1:20……1:1280（每管0.5ml），然后逐管分別加入稀釋菌液各0.5ml，zui后血清稀釋度為1:20、1:40……1:2560，充分震蕩使其混勻，于35-37℃放置16-20小時，判定結(jié)果。
根據(jù)凝集反應(yīng)的強弱或有無，分別以++++、+++、++、+、-記錄，以清晰見到凝集反應(yīng)（+）的zui高稀釋度為凝集效價。
保存：2-8℃避光保存，在有效期內(nèi)使用
注意事項：
1. 應(yīng)在光亮處先觀察管底凝集狀態(tài)，然后輕輕搖動判定結(jié)果。
2. 菌液稀釋后應(yīng)及時使用。
3. 菌液有搖不散的凝塊時，不能使用。
肥達凝集試驗
標本準備：血清，靜脈血3ml不抗凝。
原理：用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液，與被檢血清作細菌凝集反應(yīng)。若被檢血清中有抗體存在，可與相應(yīng)抗原起反應(yīng)，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象為陽性。
試劑：診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C，共5種。
使用時用生理鹽水稀釋成每毫升含7～10億（7*108～1*109）個菌的懸液備用。
檢測步驟：
1．取lOmm×lOOmm試管5排，每排8支。
2．另取15mm×lOOmm試管1支，加生理鹽水4.75m1及患者血清0.25ml混合，成為1：20稀釋血清。
3．每排第l管內(nèi)各加1:20稀釋血清0.5ml。
4．在剩余的2.5ml稀釋血清(1:20)中加人生理鹽水2.5ml，成為1:40稀釋血清。
5．再取1：40的血清，分別加入每排第2管中，每管0.5ml。在剩余的2.5ml稀釋血清(1:40)中，加入生理鹽水2.5ml，成為1:80稀釋，再加入每排第3管中，每管0.5ml，如此操作，直至加完每排第7管為止。
6．每排zui后1管各加生理鹽水0.5ml，作為不含血清的菌液對照。
7．取5種菌液充分搖勻，每種菌液加1排，血清zui終稀釋度分別為1:40、1:80、1:160直至1:2560。振蕩混合，置37C水浴16～20h后觀察結(jié)果。
結(jié)果判斷：
先觀察液體部分清晰程度，然后輕輕搖動試管，觀察管底有無凝塊浮起：
1．液體澄清、管底有凝塊、細菌*凝集者(100％凝集)，為柵++++。
2．液體微混濁、管底有明顯凝塊、細菌大部分凝集者(75％凝集)，為+++。
3．液體較混濁、管底有明顯凝塊、細菌中度凝集者(50％凝集)，為++。
4．液體混濁、管底無凝塊、細菌輕度凝集者(25％凝集)，為+。
5．液體混濁、無凝集現(xiàn)象，為陰性。
6．對照管均勻混濁無凝集現(xiàn)象。
7．被檢血清出現(xiàn)++凝集的zui高稀釋倍數(shù)為凝集效價。如第3管出現(xiàn)仲凝集，則判為1:160陽性；如各管均無凝集現(xiàn)象，則判為<l:40。
正常參考值：傷寒沙門H凝集效價1:80以下，傷寒沙門菌O凝集效價及各型副傷寒沙門H凝集效價均在1:40以下。
注意事項：
1．過去曾預(yù)防接種傷寒、副傷寒疫苗者，H抗體效價明顯升高，并持續(xù)數(shù)年，而O抗體低于正常值。
2．以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗，新近又感染流行感冒或布魯病，可產(chǎn)生價H抗體，O抗體則較低，但H抗體很快消失，此種反應(yīng)稱回憶反應(yīng)。
3．由于人們在日常生活中可能發(fā)生隱感染而產(chǎn)生抗體，尤其在流行地區(qū)正常人的凝集效價可稍高，故在判斷結(jié)果時應(yīng)考慮本地區(qū)正常人群的自然凝集效價水平作為參考。
4．沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原，在凝集試驗中可能出現(xiàn)類屬交叉凝集反應(yīng)，但效價較低。
5．陰性結(jié)果不能*排除傷寒的可能，應(yīng)注意有10％左右已確診為傷寒者在整個病程中抗體效價始終不升高。這可能與早期應(yīng)用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關(guān)。
6．肥達反應(yīng)特異性不高，機體免疫功能紊亂、結(jié)核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。
7．溶血、菌液過濃等均會影響結(jié)果。菌液過期或產(chǎn)生自凝者不宜使用。
肥達氏實驗試劑（目錄）
抗傷寒桿菌H血清
抗傷寒桿菌O血清
傷寒桿菌H菌液
傷寒桿菌O菌液
甲型副傷寒桿菌菌液
乙型副傷寒桿菌菌液
丙型副傷寒桿菌菌液
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