人Ⅲ型膠原(PⅢP)elisa試劑盒基本信息
Ⅲ型膠原蛋白，PⅢP，Ⅲ型前膠原經(jīng)氨基端內(nèi)切肽酶。
中文名 Ⅲ型膠原蛋白
正常值 0.6μg/ml
簡 稱 PⅢP
作用酶 Ⅲ型前膠原經(jīng)氨基端內(nèi)切肽酶
1979年國外已建立測定血清PⅢP的放射免疫法(RIA)，并證實肝纖維化時血清PⅢP含量與肝炎癥，壞死和肝纖維化有關，但以肝纖維化相關為主，因此血清PⅢP仍然是肝纖維化的重要標記物。PⅢP對于診斷兒童肝疾病沒有意義，它隨兒童年齡的增長有所升高。許多學者報道，血清PⅢP是反應成人肝纖維化活動的良好指標，可彌補肝活檢不能動態(tài)觀察等不足。肝硬化患者明顯升高，但在肝硬化晚期，因Ⅲ型前膠原肽合成率降低，血清中PⅢP反而低于早期。PⅢP在區(qū)別慢性活動性肝炎與慢性遷延性肝炎有良好的幫助，慢性肝PⅢP水平明顯升高，而在慢遷肝其含量與正常人無明顯差別。
人Ⅲ型膠原(PⅢP)elisa試劑盒如何操作
1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
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