分泌型堿性酶(SEAP)的用途!
分泌型堿性酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)是人胎盤(pán)堿性酶的突變體,大特點(diǎn)是能由表達(dá)細(xì)胞分泌到細(xì)胞外。檢測(cè)時(shí)可在不破壞細(xì)胞的情況下,任意時(shí)間點(diǎn)取細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行重復(fù)、動(dòng)態(tài)的檢測(cè),且被檢測(cè)細(xì)胞還可繼續(xù)其他用途。使用發(fā)光檢測(cè)方法可以進(jìn)一步提高SEAP的檢測(cè)靈敏度。
在外源基因轉(zhuǎn)錄活性研究中,報(bào)告基因發(fā)揮了很重要的作用。分泌型堿性酶報(bào)告基因系統(tǒng)是研究體外轉(zhuǎn)錄活性的有效工具。
本酶為人胎盤(pán)堿性酶缺失了細(xì)胞膜結(jié)合部位的突變蛋白,熱穩(wěn)定性比多數(shù)細(xì)胞產(chǎn)生的內(nèi)在堿性酶的同工酶高。SEAP(分泌型堿性酶)是今年來(lái)廣泛注目的報(bào)告基因,由于其能夠直接分泌到細(xì)胞外,不需要常見(jiàn)的報(bào)告基因檢測(cè)中所需要的細(xì)胞裂解操作,可以用于同一樣品中基因表達(dá)隨時(shí)間變化的檢測(cè)。