細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是*的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實驗失敗,如果沒有原始細胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄。
通用細胞凍存液以進口FBS、DMSO為主要原材料配制,適用于是各種哺乳動物原代細胞,傳代細胞系和雜交瘤細胞等的凍存保種。本產(chǎn)品為即用型試劑,儲存穩(wěn)定,使用方便,細胞存活率高。
本產(chǎn)品的使用方法同其他細胞凍存液基本一致,原則上細胞每支安瓿含1-10×106/ml。
消化到位的貼壁細胞,或后一次離心后棄掉上清液,加入細胞凍存液,重懸、吹散沉淀的細胞,分裝入細胞凍存管,密封標記后按常規(guī)操作流程依次經(jīng)4℃,-20℃,-80℃直至液氮罐或用程序降溫儀逐級降溫凍存。
注意事項:
1.取用凍存液均要在超凈工作臺內(nèi)無菌操作 。
2.初次使用融化后可在2-8℃避光保存至少1個月,少量蛋白析出不影響凍存效果。
3.凍存時從室溫可快速降到0℃,再降溫時一般按每分鐘降溫1~2℃,待降至-70℃以下時可放入液氮中,在液氮中細胞可保存數(shù)年或更長時間。
4.凍存的雜交瘤細胞要定期復(fù)蘇,檢查細胞的活性和分泌抗體穩(wěn)
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