免疫染色封閉液操作說(shuō)明
免疫染色封閉液(Immunol Staining Blocking Buffer)可以用于免疫染色時(shí)切片或細(xì)胞樣品的封閉,可減小后續(xù)的一抗或二抗和樣品的非特異性結(jié)合,降低背景,增強(qiáng)信噪比。
免疫染色封閉液中含有Tris以及適量Triton X-100等,可以通透細(xì)胞膜,經(jīng)該液封閉后的細(xì)胞樣品可以檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的目的蛋白,包括細(xì)胞漿內(nèi)和細(xì)胞核內(nèi)的目的蛋白。按照每組樣品封閉需要5~10ml免疫染色封閉液計(jì)算,一個(gè)包裝的免疫染色封閉液可以封閉10次。
產(chǎn)品組成:
免疫染色封閉液 100ml/500ml
有效期:6個(gè)月
操作步驟:
1、固定洗滌后的細(xì)胞或組織樣本(注:石蠟切片需先脫蠟),加入適量Immunol Staining Blocking Buffer完全覆蓋樣本
2、在搖床上緩慢搖動(dòng),一般封閉60min
3、進(jìn)行一抗孵育等后續(xù)操作
注意事項(xiàng):
1、如果搖動(dòng)容易導(dǎo)致樣本脫落,可以浸泡于該洗滌液中,無(wú)需搖動(dòng)漂洗
2、一經(jīng)開(kāi)啟,盡快用完,儲(chǔ)存過(guò)久的液體固定效果易下降
3、一般延長(zhǎng)洗滌時(shí)間或增加洗滌次數(shù)不會(huì)對(duì)免疫染色結(jié)果產(chǎn)生負(fù)面影響
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