標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液檢測原理
在溶血液中,血紅蛋白(硫化血紅蛋白除外)中亞鐵離子(Fe2+)被高鐵氰-化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+),血紅蛋白轉(zhuǎn)化成高鐵血紅蛋白。高鐵血紅蛋白同氰-化鉀中的氰離子反應(yīng)生成氰化高鐵血紅蛋白。氰化高鐵血紅蛋白在波長540mm左右有一個(gè)較寬的吸收峰,它在540nm處的吸光度同它在溶液中的濃度成正比。標(biāo)本中血紅蛋白的濃度可通過先測得吸光度,然后從標(biāo)準(zhǔn)曲線上按吸光度讀取。也可以同時(shí)與一標(biāo)準(zhǔn)溶液比色而得出結(jié)果。
[產(chǎn)品性能指標(biāo)]
1.標(biāo)準(zhǔn)液測定準(zhǔn)確性:測定值與定值差≤2%;
2.純度:光譜掃描圖形。從吸收曲線的形狀判斷,最高吸收峰在540nm,低吸收峰在504nm;
3.吸光度(A值):其A540/A504在1.590~1.630之間;A750≤0.002;
4.批內(nèi)不精密度:批內(nèi)不精密度的變異系數(shù)CV瓶間≤0.28%
5.批間不精密度:批間不精密度的變異系數(shù)CV瓶間≤0.5%;
6.有效期末的準(zhǔn)確度:取在有效期末的標(biāo)準(zhǔn)液的留樣進(jìn)行檢測,其溶液中血紅蛋白含量與標(biāo)示值之差≤5% 。
組成結(jié)構(gòu)人體內(nèi)的血紅蛋白由四個(gè)亞基構(gòu)成,分別為兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基,在與人體環(huán)境相似的電解質(zhì)溶液中血紅蛋白的四個(gè)亞基可以自動(dòng)組裝成α2β2的形態(tài)。血紅蛋白的每個(gè)亞基由一條肽鏈和一個(gè)血紅素分子構(gòu)成,肽鏈在生理?xiàng)l件下會(huì)盤繞折疊成球形,把血紅素分子抱在里面,這條肽鏈盤繞成的球形結(jié)構(gòu)又被稱為珠蛋白。血紅素分子是一個(gè)具有卟啉結(jié)構(gòu)的小分子,在卟啉分子中心,由卟啉中四個(gè)吡咯環(huán)上的氮原子與一個(gè)亞鐵離子配位結(jié)合,珠蛋白肽鏈中第8位的一個(gè)組-氨酸殘基中的吲哚側(cè)鏈上的氮原子從卟啉分子平面的上方與亞鐵離子配位結(jié)合,當(dāng)血紅蛋白不與氧結(jié)合的時(shí)候,有一個(gè)水分子從卟啉環(huán)下方與亞鐵離子配位結(jié)合,而當(dāng)血紅蛋白載氧的時(shí)候,就由氧分子頂替水的位置。血紅蛋白是脊椎動(dòng)物紅血細(xì)胞的一種含鐵的復(fù)合變構(gòu)蛋白,由血紅素和珠蛋白結(jié)合而成。其功能是運(yùn)輸氧和二氧化碳,維持血液酸堿平衡。也存在于某些低等動(dòng)物和豆科植物根瘤中。分子量約67 000,含有四條多肽鏈,每個(gè)多肽鏈含有一個(gè)血紅素基團(tuán),血紅素中鐵為二價(jià),與氧結(jié)合時(shí),其化學(xué)價(jià)不變,形成氧合血紅蛋白。呈鮮紅色,與氧解離后帶有淡藍(lán)色。